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      柱層析硅膠廠家介紹色譜柱的維護方法有哪些

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      柱層析硅膠廠家介紹色譜柱的維護方法有哪些

      2019-08-30

      1. 色譜柱的平衡 

           反相色譜柱由工廠測試后是保存在乙腈/水中的。新柱應先使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈沖洗色譜柱。請一定確保您分析樣品所使用的流動相和乙腈/水互溶。 每天用足夠的時間以流動相來平衡色譜柱,您就會在處理問題方面獲得的”補償”,而且您的色譜柱的壽命也會變得更長!操作步驟:

          a. 平衡開始時將流速緩慢地提高,用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線(緩沖鹽或離子對試劑流速如果較低,則需要較長的時間來平衡)

          b. 如果使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意用純水”過渡”即每天分析開始前必須先用純水沖洗30分鐘以上再用緩沖鹽流動相平衡; 分析結束后必須先用純水沖洗30分鐘以上除去緩沖鹽之后再用甲醇沖洗30分鐘保護柱子。

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          2. 色譜柱的再生

           長期使用的色譜柱,往往柱效會下降(柱子的理論塔板數減低)??梢詫ιV柱進行再生,在有條件的實驗室應使用一個廉價的泵進行柱子的再生?!?nbsp;

          建議用來沖洗柱子的溶劑體積

          色譜柱尺寸 柱體積 所用溶劑的體積

          125-4mm 1.6ml 30ml

          250-4 mm 3.2ml 60ml

          250-10mm 20ml 400ml

          選擇再生方法:

          極性固定相(如Si,NH2* ,DIOL基色譜填料)的再生:

          正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**

          非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8,CN等)的再生: 水→乙腈→氯仿(或異丙醇)→乙腈→水

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          注意:

          a. 柱層析硅膠廠家在對NH2改性的色譜柱進行再生時,由于NH2可能以銨根離子的形式存在,因此應該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。 

          b. 0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱,如果簡單的用有機溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質,在水洗后加用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。

          3. 色譜柱的維護 

          a.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)

          b.大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2-7.5,盡量不大于該色譜柱的pH范圍

          c.避免流動相組成及極性的劇烈變化

          d.流動相使用前必須經脫氣和過濾處理

          e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中

          f.氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。


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